Jaké jsou metody odhadu redukujícího cukru?

1. Fehlingův test:

- Fehlingův roztok se skládá ze směsi síranu měďnatého a vinanu sodnodraselného.

- Když se redukující cukr zahřívá v alkalickém prostředí s Fehlingovým roztokem, redukuje měďnaté ionty (Cu2+) na měďné ionty (Cu+).

- Redukce měďnatých iontů je indikována tvorbou červenooranžové sraženiny oxidu měďného (Cu2O).

- Množství přítomného redukujícího cukru se stanoví měřením množství redukovaných iontů mědi, které lze kvantifikovat kolorimetricky.

2. Benediktův test:

- Benediktův roztok je podobný Fehlingovu roztoku, ale místo tartrátových iontů obsahuje citrátové ionty.

- Princip Benediktova testu je stejný jako u Fehlingova testu, spočívá v redukci měďnatých iontů na měďnaté ionty redukcí cukrů.

- Redukce je indikována změnou barvy z modré na zelenou, žlutou, oranžovou a nakonec na červenou sraženinu oxidu měďného.

- Množství přítomného redukujícího cukru se stanoví pozorováním změny barvy a jejím porovnáním se standardní barevnicí.

3. Metoda DNS (kyselina 3,5-dinitrosalicylová):

- Metoda DNS je kolorimetrický test redukujících cukrů založený na reakci redukujících cukrů s činidlem kyseliny 3,5-dinitrosalicylové (DNS).

- Při zahřívání za kyselých podmínek redukují redukující cukry DNS za vzniku barevného produktu s maximem absorbance při 540 nm.

- Intenzita vytvořeného zbarvení je úměrná koncentraci redukujících cukrů ve vzorku.

- Množství přítomného redukujícího cukru se kvantifikuje měřením absorbance roztoku při 540 nm a porovnáním se standardní křivkou.

4. Somogyi-Nelsonova metoda:

- Metoda Somogyi-Nelson je dalším kolorimetrickým testem pro redukující cukry.

- Zahrnuje reakci redukujících cukrů s alkalickým roztokem síranu měďnatého za vzniku komplexu měď-cukr.

- Na tento komplex se poté působí arsenomolybdenanovým činidlem, které redukuje komplexované ionty mědi a vytváří modře zbarvený roztok.

- Množství přítomného redukujícího cukru se stanoví měřením absorbance modrého roztoku při 520 nm a jejím porovnáním se standardní křivkou.

5. Vysoce výkonná kapalinová chromatografie (HPLC):

- HPLC je separační technika, kterou lze použít k analýze a kvantifikaci redukujících cukrů ve složitých směsích.

- Separuje sloučeniny na základě jejich chemických vlastností a interakcí se stacionární fází kolony.

- Redukující cukry lze detekovat a kvantifikovat pomocí detektorů indexu lomu (RI) nebo ultrafialového záření (UV-Vis).

- HPLC poskytuje přesnou a citlivou analýzu jednotlivých redukujících cukrů ve vzorcích.

Toto jsou některé z běžně používaných metod pro odhad redukujících cukrů. Výběr metody závisí na faktorech, jako je matrice vzorku, požadovaná úroveň přesnosti a citlivosti a dostupnost přístrojového vybavení.